Loading...
Агаарын PM2.5 нарийн ширхэгт тоосонцор элэгний хавдрын шугаман эсэд үзүүлэх нөлөөг in vitro орчинд судалсан дүн
Зохиогч
Д.Юндэндаш
Л.Сугар
Э.Билгүүн
Н.Ням-Эрдэнэ
Э.Есүхэй
Т.Одончимэг
Б.Батчимэг
Б.Мөнхцэцэг
Ж.Сарантуяа
С.Мөнхбаяр
Он
2024 оны гуравдугаар сарын 20
Төрөл
journal article
Journal
Эрүүл мэндийн шинжлэх ухаан
Volume
20
Issue
3
Start Page
5
End Page
9
ISSN
2959-6947
Хураангуй
Үндэслэл: Агаарын нарийн ширхэгт тоосонцор PM2.5 нь 2.5 HepG2 микрометрийн аэродинамик голчтой ба тээврийн хэрэгсэл, үйлдвэрийн Агаарын бохирдол болон ахуйн гаралтай түлшний шатах процессын үед ялгардаг олон Particulate matter төрлийн химийн бодис бүхий холимог төлөвтэй нэгдэл юм. Ruyi Li Нүүн шилжилт нарын судалгаагаар агаарын PM2.5 нарийн ширхэгт тоосонцор Matrix metalloproteinases (MMPs) уургуудын нийлэгжилд нөлөөлөх замаар хавдрын нүүн шилжилт, эмгэг жамд оролцдог байж болзошгүй талаар өгүүлсэн байна. Qian zhang нарын судалгаанд элэгний эст өмөнгийн эсийн үржил, нэвчилт, нүүн шилжилтэд PM2.5 тоосонцор (PM-Particulate matter) нөлөөлж буйг дурджээ. Зорилго: Агаарын PM2.5 нарийн ширхэгт тоосонцрын элэгний хавдрын эсэд (HepG2) үзүүлэх нөлөөг in vitro орчинд судлан тогтоох. Арга, аргачлал: Анагаах Ухааны Хүрээлэн (АУХ)-ийн Эрдэм шинжилгээний төв лабораторийн эсийн банкинд хадгалагдаж буй элэгний эст өмөнгийн HepG2 шугаман эсийг ашиглаж дулбеккогийн эсийн тэжээлт орчинд 10% ургийн үхрийн ийлдэс, 1%ийн антибиотикийн холимог нэмэн 5%-ийн CO2-ийн агууламжтай 370С-ийн орчинд өсгөвөрлөж, 4-5 удаагийн сэлгэн зорчуулалт хийсний дараа туршилтад ашигласан. Элэгний хавдрын HepG2 шугаман эсийн өсгөврийг Улаанбаатар хотын Бөхийн өргөө орчмоос 2019 оны 03 сард цуглуулсан PM2.5 тоосонцрын тодорхой тунгаар үйлчилж, МТТ шинжилгээний аргаар эсийн амьдрах чадварыг тодорхойлон сонгосон тунг дараагийн туршилтуудад ашиглав. HepG2 эсийн нүүн шилжилт, хавдрын эсийн үсэрхийлэлд оролцдог MMP1, MMP9 уургуудын нийлэгжилтийг wound healing болон иммуноцитохимийн аргуудаар тус тус тодорхойлж, хяналтын бүлэгтэй харьцуулав. Микроскопын тусламжтай зураг авч Image J программыг ашиглан үр дүнг боловсруулав. Үр дүнгийн статистик боловсруулалтыг Microsoft Excel 2010 программаар, графикийг Graphpad Prism 8 программыг ашиглан хийж гүйцэтгэв. Бүлгүүдийн хоорондын ялгааг Стюдентийн Т тестээр үр дүнг тооцоолон боловсруулсан ба p утгыг <0.05 байх үед ач холбогдолтой гэж үзэв. Үр, дүн: МТТ шинжилгээний үр дүнд PM2.5 тоосонцрын 5, 15 мкг/мл тунгууд эсийн амьдрах чадварыг нэмэгдүүлж (103.2, 108.1%) байсан бол 25 мкг/мл-ээс дээш тун хамааралтайгаар эсийн амьдрах чадварыг дарангуйлж байв. МТТ шинжилгээний үр дүнгээр сонгон авсан PM2.5 тоосонцрын 5, 15, 25 мкг/мл тунгаар HepG2 эсэд үйлчилснээс 24 болон 48 цагийн дараа wound healing шинжилгээгээр хяналтын бүлгийн эсүүд зурвасын 49%, 68%-ийг бүрхэн ургасан бол 5мкг/мл тун зурвасын 53%, 76%-ийг, 15 мкг/мл тун зурвасын 64%, 86%-ийг, 25 мкг/мл PM2.5 тоосонцрын тунгаар үйлчилсэн HepG2 эс зурвасын 49%, 66%-ийг тус тус бүрхэн ургасан байна. Улмаар PM2.5 тоосонцрын 15мкг/мл тунгаар HepG2 эсийг 24 цаг үйлчилсний дараа MMP1, MMP9 уургуудын нийлэгжилтийг иммуноцитохимийн шинжилгээний аргаар хяналтын бүлэгтэй харьцуулан үнэлэхэд хяналтын бүлэгт харах талбайн нийт эсийн 7.86% (3.35-11.57%)-д MMP1, 12.03% (7.4418.28%)-д MMP9 уураг эерэг илэрцтэй байсан бол PM2.5 тоосонцроор үйлчилсэн бүлэгт 23.83% (13.40-34.04%)д MMP1, 31.22% (26.72-35.97%)-д MMP9 уураг тус тус эерэг илэрцтэй байсан нь статистик ач холбогдол бүхий ялгаатай байлаа (p<0.001), (p<0.001). Дүгнэлт: Улаанбаатар хотын Бөхийн өргөө орчмоос цуглуулсан PM2.5 тоосонцрын 25 мкг/мл-ээс дээш тунгууд in vitro орчинд HepG2 эсийн амьдрах чадварыг дарангуйлж байна. Мөн PM2.5 тоосонцор нь in vitro орчинд HepG2 шугаман эсийн нүүн шилжилтийг нэмэгдүүлсэн төдийгүй, нүүн шилжилтэд оролцдог MМP1, MMP9 уургуудын нийлэгжилтийг ихэсгэж байна.
Background: PM2.5 is a mixture of various chemical substances released during the combustion of vehicles, industrial processes, and household fuels. It penetrates into the alveoli and enters the bloodstream. Ruyi Li et al. reported that PM2.5 fine particles in the air enhance the synthesis of Matrix metalloproteinases (MMPs) proteins and may be involved in migration and pathogenesis. In the study by Qian Zhang et al., PM2.5 particles had an effect on the proliferation, invasion, and migration of HCC. Aim: In vitro study of the effect of PM2.5 fine particles on hepatocellular carcinoma (HepG2) Materials and Methods: A human liver cancer cell line (HepG2) was obtained from the Central Scientific Research Laboratory at the Institute of Medical Sciences. HepG2 cells were seeded at a concentration of 1*105 cells/mL in a culture flask and cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS, and 1% antibiotic mix (penicillin, streptomycin) in a humidified atmosphere of 5% CO2 at 37 °C. The cytotoxic effect of PM 2.5 in HepG2 cells was evaluated using an MTT assay. After the MTT assay, HepG2 cells were seeded on cell culture dishes with prepared cover glasses and treated with the selected PM 2.5 dosage. The expression of MMP1 and MMP9 proteins, which are involved in HepG2 cell migration and tumor cell metastasis, was determined using wound healing and immunocytochemical methods, respectively, and compared with the control group. Images were captured under a microscope, and the results were processed using Image J software. Statistical analysis of the results was performed using Microsoft Excel 2010, and graphics were generated using Graphpad Prism 8 software. Differences between groups were calculated by Student’s t test, and significance was considered when the p value was <0.05. Results: By MTT assay, PM2.5 doses of 5 and 15 μg/ml increased cell viability (103.2 and 108.1%), while doses above 25 μg/ml decreased cell viability. In the HepG2 cell line, doses of 5, 15, 25μg/ml of PM2.5 particles were selected based on MTT analysis after 24 and 48 hours of treatment. The percentages of gap closure were 49% and 68% in control group, 53% and 76 % in 5 μg/ml group, 64% and 86% in 15 μg/ml group, 49% and 66% in the 25 μg/ml group at 12 and 24 hours, respectively. The HepG2 cell group treated with 15μg/ml of PM2.5 particles was compared with the control group to evaluate MMP1, MMP9 protein synthesis. By Immunocytochemistry assay, MMP9 protein staining intensity was 12.03% (7.44-18.28%), while MMP1 was 7.86% (3.35-11.57%) in control group, whereas MMP9 protein staining intensity was 31.22% (26.7235.97%), MMP1 was 23.83% (13.40-34.04%) in PM2.5 treated group, which is statistically significant (p<0.001), (p<0.001). Conclusions: Doses of PM2.5 particles collected from the Bokhiin Urgoo area of Ulaanbaatar city, above 25 μg/ml, inhibit the viability of HepG2 cells in vitro. In addition, PM2.5 particles not only increased the migration of the HepG2 cell line in vitro but also enhanced the synthesis of MMP1 and MMP9 proteins, which are involved in migration.
Нэмэлт мэдээлэл
Бүрэн эх: https://journal.mnums.edu.mn/index.php/emsu/article/view/1015
Эшлэл
Д.Юндэндаш, Л.Сугар, Э.Билгүүн, Н.Ням-Эрдэнэ, Э.Есүхэй, Т.Одончимэг нар. Агаарын PM2.5 нарийн ширхэгт тоосонцор элэгний хавдрын шугаман эсэд үзүүлэх нөлөөг in vitro орчинд судалсан дүн. Эрүүл мэндийн шинжлэх ухаан. 2024;20(3):5-9.