Loading...
Хулганын макрофаг төст эсэд IFN-Ɣ-аар өдөөгдөгсөн азотын дан ислийн гарцад CpG ODN1826 нөлөөг тодорхойлох
Зохиогч
Ү.Сувд-Эрдэнэ
С.Энхтуяа
Т.Өлзийхүү
С.Оюун
Э.Хашчулуун
Ч.Онон
Б.Ариунзаяа
Т.Хонгорзул
С.Цогтсайхан
Т.Балжинням
Он
2024 оны дөрөвдүгээр сарын 13
Төрөл
journal article
Journal
Эрүүл мэндийн шинжлэх ухаан
Volume
20
Issue
4
Start Page
21
End Page
24
ISSN
2959-6947
Хураангуй
Үндэслэл: CpG ODN 1826 нь синтетик аргаар гарган авсан цитозин фосфот гуанинаар баялаг богино, дан утаслаг ДНХ дараалал юм. Зарим судлаачдын судалгаагаар TLR9-н лиганд, CpG ODN нь IFN-Ɣ-аар өдөөгдөх транскрипцийн генүүдийг идэвхжүүлэх ба үүний нөлөөгөөр транскрипцийн нэгж болох iNOS уургийн өдөөлтөөр NO азотын дан исэл)-ийн гарцыг нэмэгдүүлсэн талаар судлагдсан байдаг. Зорилго: Raw 264.7 эсэд IFN-Ɣ-аар өдөөгдсөн азотын ислийн гарцад CpG ODN1826 нөлөөг тодорхойлох. Арга, аргачлал: Энэхүү судалгааг АШУҮИС-н Био-Анагаахын хүрээлэнгийн эсийн өсгөврийн лаборатори, БиоАнагаахын Сургуулийн Дархлаа судлал тэнхимийн Эмнэлзүйн эмгэг судлалын лабораторийг түшиглэн хийж гүйцэтгэсэн. Туршилтын загвар болгон Raw 264.7 эсийг өсгөвөрлөн 96 well plate рүү нэг нүхэнд 100мкл эзлэхүүнтэй, 10000 эс байхаар тооцон хийж 37ºС; 5%-ийн СО2 инкубаторт 24 цаг инкубаци хийсэн. Туршилтын бүлгүүдэд 1. PBS (сөрөг хяналт) 2. IFN-Ɣ (эерэг хяналт) 3. IFN-Ɣ + ODN1826 тус тус орно. Эмчилгээг 37ºС; 5%-ийн СО2 инкубаторт 24, 48, 72 цагийн турш инкубаци хийж, эсийн өсгөврийн супернатантаас 50 мкл-ыг авч NO-ийн гарцыг Грейссийн аргаар тодорхойлов. Үр дүн: Туршилтад Raw 264.7 эсэд 24,48,72 цагуудад азотын ислийн гарц бүх бүлэгт дараалан нэмэгдсэн. 72 цагийн үр дүнг харьцуулан үзэхэд сөрөг хяналттай харьцуулахад бүх бүлэг статистикийн үнэн магадлалтай ялгаатайгаар азотын ислийн гарц ихэссэн байлаа. Харин эерэг хяналт болох IFN-Ɣ өдөөгдсөн бүлэгтэй харьцуулахад ODN1826 нь азотын ислийн гарцыг эрчимжүүлсэн (p<0.001). Дүгнэлт: ODN1826 CpG нь азотын ислийн гарцыг нэмэгдүүлж байгаа ба iNOS уургийг нийлэгжлийг ихэсгэж байна.
Aim: Determination of the effect of ODN1826 CpG on IFN-Ɣ-stimulated NO production in Raw 264.7 cells Materials and methods: This study was carried out with the support of the Cell Culture Laboratory of the Institute of Bio-Medical Sciences of MNUMS, and the Clinical Pathology Laboratory of the Department of Immunology of Bio-Medical School. Raw 264.7 cells were cultured in a 96 well plate with a volume of 100 μl and 10,000 cells per well for 24 hours at 37ºС; 0.5% CO2 incubator. Experimental groups include 1. PBS (negative control) 2. IFN-Ɣ (positive control) 3. IFN-Ɣ + ODN1826. Incubation with treatment substances at 37ºС; 0.5% CO2 incubator for 24, 48, and 72 hours, 50 μl of the cell culture supernatant was taken and NO yield was the determined by Greiss method. The cells were lysed using RIPA lysis buffer, and the protein concentration was determined using the BCA method. SDS gel electrophoresis was performed to separate protein molecular weights, and the gel was stained with Coomassie Blue dye. Results: In the experiment, the nitric oxide (NO) output in RAW cells at 24, 48, and 72 hours increased consecutively in all groups. When comparing the results at 72 hours, all groups exhibited statistically significant increases in Nitric Oxide output compared to the negative control. In comparison with the positive control and the IFN-Ɣ induced group, ODN1826 significantly enhanced nitric oxide production (p < 0.001). The protein was run on an SDS gel and stained with Coomassie Blue, revealing the iNOS protein. Conclusion: ODN1826 CpG increases nitric oxide production and induces iNOS protein synthesis.
Нэмэлт мэдээлэл
Бүрэн эх: https://journal.mnums.edu.mn/index.php/emsu/article/view/169
Эшлэл
Ү.Сувд-Эрдэнэ, С.Энхтуяа, Г.Энхтүшиг, Т.Хүсэлт-Од, Т.Өлзийхүү, С.Оюун нар. Хулганын макрофаг төст эсэд IFN-Ɣ-аар өдөөгдөгсөн азотын дан ислийн гарцад CpG ODN1826 нөлөөг тодорхойлох. Эрүүл мэндийн шинжлэх ухаан. 2024;20(4):21-24.